激光共聚焦顯微鏡和熒光顯微鏡在原理、特點(diǎn)以及應(yīng)用領(lǐng)域上存在顯著差異。以下是兩者的詳細(xì)區(qū)別介紹:
一、原理不同
熒光顯微鏡:以紫外線為光源,用以照射被檢物體,使之發(fā)出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。這種顯微鏡主要用于觀察和研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。
激光共聚焦顯微鏡:在熒光顯微鏡成像的基礎(chǔ)上加裝激光掃描裝置,使用紫外光或可見光激發(fā)熒光探針。該顯微鏡利用激光束作為光源,通過光源針孔與檢測針孔共軛聚焦技術(shù),對(duì)樣本進(jìn)行斷層掃描,以獲得高分辨率的光學(xué)切片圖像。
二、特點(diǎn)不同
光源為紫外線。
適用于觀察細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的熒光特性,如葉綠素等受紫外線照射后可發(fā)熒光的物質(zhì),以及通過熒光染料或熒光抗體染色后發(fā)熒光的物質(zhì)。
在生物學(xué)、醫(yī)療、礦物學(xué)、材料科學(xué)等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。
激光共聚焦顯微鏡:
利用計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖像處理,得到細(xì)胞或組織內(nèi)部微細(xì)結(jié)構(gòu)的熒光圖像。
能夠在亞細(xì)胞水平上觀察諸如Ca2?、pH值、膜電位等生理信號(hào)及細(xì)胞形態(tài)的變化。
具有多重染色能力,各染料之間的cross-talk較少,且Z軸上的分解能高,可了解組織的3D結(jié)構(gòu),觀察被染上熒光的物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布。
脫離了傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡的場光源和局部平面成像模式,采用激光束作為光源,實(shí)現(xiàn)逐點(diǎn)掃描成像,成像清晰度高。
三、應(yīng)用領(lǐng)域不同
在生物學(xué)領(lǐng)域,用于研究細(xì)胞和亞微觀細(xì)胞成分。
在醫(yī)療領(lǐng)域,用于檢測細(xì)菌、病毒的存在和分布,或?qū)ν饪颇繕?biāo)進(jìn)行輔助標(biāo)記。
在礦物學(xué)領(lǐng)域,研究有自發(fā)熒光特性的物質(zhì)。
在材料科學(xué)領(lǐng)域,分析基于纖維的材料。
激光共聚焦顯微鏡:
廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)、藥理學(xué)、生理學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、遺傳學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)、病理學(xué)及病理學(xué)臨床應(yīng)用等多個(gè)領(lǐng)域。
具體應(yīng)用包括細(xì)胞結(jié)構(gòu)分析、酶和受體分析、藥物作用研究、細(xì)胞膜電位測量、細(xì)胞生長和分化研究等。
綜上所述,激光共聚焦顯微鏡和熒光顯微鏡在原理、特點(diǎn)和應(yīng)用領(lǐng)域上均有顯著區(qū)別。激光共聚焦顯微鏡以其高分辨率、多重染色能力和亞細(xì)胞水平觀察能力,在科研和臨床應(yīng)用中發(fā)揮著重要作用。